本規程旨在為微生物實驗室操作提供一個標準化規程；

二、適用范圍：

微生物實驗室；

三、責任人：

實驗室、微生物檢測員；

四、安全注意事項：

嚴格遵循無菌操作，防止微生物污染;操作人員進入微生物實驗室應先關掉紫外燈。

五、微生物實驗室標準化操作規程：

1.微生物實驗室應設有無菌操作間和緩沖間，無菌操作間潔凈度應達到10000級，室內溫度保持在20-24℃，濕度保持在45-60%，超凈臺潔凈度應達到100級。

2.微生物實驗室應保持清潔，嚴禁堆放雜物，以防污染。

3.嚴防一切滅菌器材和培養基污染，已污染者應停止使用。

4.微生物實驗室應備有工作濃度的消毒液(75％的酒精)。

5.微生物實驗室應定期用適宜的消毒液滅菌清潔，以保證微生物實驗室的潔凈度符合要求。

6.需要帶入微生物實驗室使用的儀器，器械，平皿等一切物品，均應包扎嚴密，并應經過適宜的方法滅菌。

7.工作人員進入微生物實驗室前，必須用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在緩沖間更換專用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(用75%的乙醇再次擦拭雙手)，方可進入微生物實驗室進行操作。

8.微生物實驗室使用前必須打開微生物實驗室的紫外燈輻照滅菌30分鐘以上，并且同時打開超凈臺進行吹風。操作完畢，應及時清理微生物實驗室，再用紫外燈輻照滅菌30分鐘。

9.供試品在檢查前，應保持外包裝完整，不得開啟，以防污染。檢查前，用75%的酒精棉球消毒外表面。

10.每次操作過程中，均應做空白對照，以檢查無菌操作的可靠性。

11.吸取菌液時，必須用吸耳球吸取，切勿直接用口接觸吸管。

12.接種針每次使用前后，必須通過火焰灼燒滅菌，待冷卻后，方可接種培養物。

13.帶有菌液的吸管，試管，培養皿于高壓蒸汽滅菌鍋121℃保持20min后取出清洗。

14.如有菌液灑在桌上或地上，應立即用75%酒精溶液覆在被污染處至少30分鐘，再做處理。工作衣帽等受到菌液污染時，應立即脫去，高壓蒸汽滅菌后洗滌。

15.凡帶有活菌的物品，必須經消毒后，才能在水龍頭下沖洗，嚴禁污染下水道。

16.微生物實驗室應每月檢查菌落數。在超凈工作臺開啟的狀態下，取內徑90mm的無菌培養皿若干，無菌操作分別注入融化并冷卻至約45℃的營養瓊脂培養基約15mL，放至凝固后，倒置于30-35℃培養箱培養48小時，證明無菌后，取平板3-5個，分別放置工作位置的左中右等處，開蓋暴露30分鐘后，倒置于30-35℃培養箱培養48小時，取出檢查。100級潔凈區平板雜菌數平均不得超過1個菌落，10000級潔凈室平均不得超過3個菌落。如超過限度，應對微生物實驗室進行徹底消毒，直至重復檢查合乎要求為止。

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