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免疫中和反應技術(Neutralization test technique):簡單定性中

放大字體  縮小字體 發布日期:2006-06-27

病毒或毒素與相應的抗體結合后,失去對易感動物的致病力,謂之中和試驗。本試驗主要用于:①從待檢血清中檢出抗體,或從病料中檢出病毒,從而診斷病毒性傳染病;②用抗毒素血清檢查材料中的毒素或鑒定細菌的毒素類型;③測定抗病毒血清或抗毒素效價;④新分離病毒的鑒定和分型,中和試驗不僅可在易感的實驗動物體內進行,亦可在細胞培養上或雞胚上進行。試驗方法主要有簡單定性試驗、固定血清稀釋病毒法、固定病毒稀釋血清法、空斑減少法等。

本法主要用于檢出病料中的病毒,亦可進行初步鑒定或定型。先根據病毒易感性選定試驗動物(或雞胚、細胞培養)及接種途徑。將病料研磨,并稀釋成一定濃度(約100 LD50~1 000LD50或TCID50)。污染的病料需加抗生素(青霉素、鏈霉素各200~1 000單位),或用細菌濾器過濾,與已知的抗血清(適當稀釋或不稀釋)等量混合,并用正常血清加稀釋病料作對照。混合后置37℃1h,分別接種實驗動物,每組至少3只。分別隔離飼喂,觀察發病和死亡情況。對照動物死亡,而中和組動物不死,即證實該病料中含有與該抗血清相應的病毒。本法亦可用于毒素(如肉毒毒素)的鑒定和分型。

 
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