最常用的細菌鑒別染色法之一。未經染色之細菌，由于其與周圍環境折光率差別甚小，故在顯微鏡下極難觀察。染色后細菌與環境形成鮮明對比，可以清楚地觀察到細菌的形態、排列及某些結構特征，而用以分類鑒定。革蘭氏染色屬復染法，即將標本固定后，先用龍膽紫染色，加碘液媒染后用酒精脫色，再用稀釋復紅復染。染色后除可以看到細菌形態外，還可將細菌分為兩大類，即不被酒精脫色而保留紫色者為革蘭氏陽性菌（G ）。被酒精脫色復染成紅色者為革蘭氏陰性菌（G^-）。革蘭氏染色原理尚不肯定，可能與細菌所帶核糖核酸、細菌壁結構通透性、等電點等因素有關。致病菌如金黃色葡萄球菌、綠色溶血性鏈球菌、肺炎球菌、白喉桿菌、碳疽桿菌等屬革蘭氏染色陽性菌。百日咳桿菌、大腸桿菌、傷寒桿菌、痢疾桿菌、霍亂弧菌、流行性腦膜炎雙球菌、淋病雙球菌等均屬革蘭氏陰性。所以根據細菌的革蘭氏染色性質，可以縮小鑒定范圍，有利于進一步分離鑒定，以對疾病做出診斷。又由于各種抗生素的抗菌譜不同，革蘭氏染色尚可做為選用抗生素的參考。