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組成成分
營養物質
不同的細菌對營養的要求不同，但細菌需要的營養物質應含有氨源、碳源、無機鹽類和生長因子等。
1、蛋白：最常用的成分之一， 提供細菌生長繁殖所需要的氮源，含胨、多肽和多種氨基酸，為大多數細菌生長所利用。易溶于水遇酸不沉淀，不因受高溫而凝固，為兩性電解質有緩沖作用。
2、肉浸液：用新鮮牛肉浸泡、煮沸而制成的肉汁。含有可溶性含氮浸出物和非含氨漫出物，還有一些生長因子。可為細菌提供氨源和碳源，但所含氮物質過少不能滿足細菌的需要，因此在制備培養基應加入1%~ 2%的蛋白胨和0.5%氯化鈉。
3、牛肉膏：由肉浸液經長時間加熱濃縮而制成。糖類在加熱過程中被破壞，其營養價值低于肉浸液，可用作腸道桿菌鑒別培養基的基礎成分。
4、糖類、醇類：為細菌生長提供碳源和能源。制備培養基所用的糖類、醇類有多種，常用的糖類有單糖、雙糖和多糖；常用的醇類有甘露醇、衛茅醇等。葡萄糖、蔗糖主要作為碳源和能源的基本成分，其他糖類和醇類主要用于鑒定細菌所做的發酵反應。
5、血液：血液中含有多種營養物質，又能提供輔酶、血紅素等特殊生長因子，用于培養營養要求較高的細菌。還可根據細菌在血液培養基中的溶血現象而進行鑒定。
6、無機鹽類：提供細菌生長的各種元素，如鉀、鈉、鐵、鎂、鈣、磷、硫等。最常用的有氯化鈉和磷酸鹽，前者維持酶的活性、調節菌體內外的滲透壓，后者是細菌良好的磷源，并具有緩沖作用。
7、雞蛋和動物血清：不是基本成分，是某些細菌生長所必需的營養物質，僅用于制備特殊的培養基。如培養結核分枝桿菌的雞蛋培養基和培養白喉桿菌的呂氏血清培養基等。
8、生長因子：為細菌生長所必需的，需要量很小。常在肝浸液、肉浸液、醇母浸液和含血液培養基中加入維生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等生長因子。
凝固物質
制備固體培養基時，需在液體中加入凝固物質。常用凝固物質為瓊脂，某些情況下也可用明膠、卵白蛋白、血清等。瓊脂是從石花菜中提取出來的一種半乳糖膠，溫度在98℃以上時可溶于水，在45℃以下可凝固成凝膠狀態，不被細菌分解利用，無營養作用。
抑制劑和指示劑
制備培養基時常加入抑制劑和指示劑，不是細菌生長繁殖所必需的物質，而是選擇、鑒定及判斷結果的需要。
1、抑制劑：具有選擇抑制作用，在制備培養基 時加入定種類的抑制劑， 可抑制非檢出菌（非病原菌）的生長，利于檢出菌（病原菌）的生長，常用有膽鹽，煌綠、亞硫酸鈉、亞硒酸鈉及-些染料和某些抗生素等。
2、指示劑：在培養基中加入一定種類的指示劑， 觀察細菌是否利用和分解培養基中的糖、醇類。常用的有粉紅、甲基紅、中性紅、溴甲酚紫、溴麝香草酚藍和中國藍等酸堿指示劑。亞甲藍常用作氧化還原指示劑。
種類
1、基礎培養基：含有細菌基礎生長所需的基本營養成分，最常用的是肉浸液，俗稱肉湯，主要含生肉浸液和蛋白胨，用于細菌的增菌、檢驗，也是制備其他培養基的基礎成分。
2、營養培養基：基礎培養基中加入血液、 葡萄糖、生長因子等特殊成分，供營養要求高的細菌和需要特殊生長因子的細菌生長，最常用的是血瓊脂平板和巧克力血平板等。
3、鑒別培養基：在某些培養基中加入一些特定物質， 如糖、苷、醇類、氨基酸、蛋白質等和指示劑，測定細菌的生化反應，以鑒別和鑒定細菌用的培養基。例如糖發酵管、克氏雙糖鐵瓊脂(KIA)、伊紅-亞甲藍瓊脂和動力-吲哚-尿素(MIU) 培養基等。
4、選擇培養基：在培養基中加入抑制劑，抑制標本中雜菌生長，有助于所選擇的細菌種類的生長。如培養腸道致病菌的沙門-志賀瓊脂。
5、特殊培養基：某些細菌在生長繁殖時需要特殊的條件才能夠生長，包括厭氧培養基和細菌L型培養基等。前者是培養專性厭氧菌的培養基，后者是針對細胞壁缺損的細菌L型。
分離培養基的選擇
1、血平板：適合各類細菌的生長，一般細菌檢驗標本的分離，都應接種此平板。
2、巧克力血平板：含有V和X因子，適于接種疑有嗜血桿菌、奈瑟菌等的標本。
3、中國藍平板或伊紅亞甲藍平板：抑制革蘭陽性細菌，促進革蘭陰性細菌生長，是較好的弱選擇性培養基。發酵型革蘭陰性桿菌在此平板上菌落顏色不同，便于鑒別菌種。
4、麥康凱平板：為中等強度選擇性，抑菌力略強，少數革蘭陰性菌不生長。在麥康凱平板上能否生長，是非發酵菌鑒定的一個依據。
5、沙門-志賀瓊脂：有較強的抑菌力，用于志賀菌和沙門菌的分離。因選擇性過強，影響檢出率，使用時最好加一種弱選擇平板以配對互補。
6、堿性瓊脂或TCBS瓊脂：用于從糞便中分離霍亂弧菌及其他弧菌。
7、血液增菌培養基：用于從血液、骨髓中分離常見病原菌。
8、營養肉湯：用于標本及各類細菌的增菌。
如痰標本一般選用血平板、中國藍/麥康凱、巧克力平板做分離。中國藍/麥康凱用于篩選革蘭陰性桿菌；血平板則用于肺炎鏈球菌、白喉棒狀桿菌等的分離:而含桿菌肽的巧克力平板則用于篩選嗜血桿菌等。 
