1、這是根據酒精的殺菌機理與特點經過測定而確定的。由于細菌不具備進行氧化的細胞器如線粒體，其氧化代謝的酶均分布于細胞膜的表面；故其細胞膜蛋白質的干重可以達到70%以上，蛋白質是酒精殺滅因子的靶點物質。

2、酒精殺滅細菌的原理，主要是能滲入細菌體內，吸收細菌蛋白的水分，使組成細菌的蛋白質凝固，引起蛋白質的變性和沉淀，從而達到殺滅細菌的目的。

（1）如果酒精濃度過高，達到80%以上的濃度就會大大增強、加快蛋白質凝固的速度，使微生物族群的外層微生物接觸到酒精時，細胞膜上的蛋白質就發生迅速的變性凝固而形成對內層、里面微生物群體的包膜稱之為：保護層。這個保護層為一層通透性極差的蛋白質層，阻止了酒精殺滅因子繼續向菌體內部的微生物群體的滲透，阻斷了酒精殺滅因子進入菌群、菌體內部，將全部微生物殺死。

（2）由于細菌都不是單獨孤立存在的，而是以族群的形式存在的，菌群深層內部的、未接觸到酒精殺滅因子的微生物個體就不能被殺死。這些在包膜保護層內的未被殺滅的細菌待到適當時機如：包膜保護層破裂，就將沖破包膜保護層重新露出復活、生長繁殖。

（3）達到80%以上并濃度逐漸增高的酒精，其滲透性逐漸降低。尤其是高濃度時，酒精的殺滅因子就更不能透過這個由外層菌體蛋白質變性形成的包膜保護層而滲入菌群的內部，接觸到深層的每個細菌，導致殺菌能力逐漸減弱，就達不到消毒的目的了。

二、綜合殺菌效果最佳濃度是65—75%

酒精殺菌消毒能力的強弱，其濃度的高低起著關鍵性的作用，過高或過低都不行。

經過測定，使用65% ～ 75％的酒精，既能使組成細菌的蛋白質凝固，又不形成阻擋酒精殺滅因子穿透的保護包膜。因而，就能使酒精殺滅因子繼續向菌群內部滲透，65—75%的酒精與細菌的滲透壓相近，可以在細菌表面蛋白質未變性前逐漸不斷地向菌體內部滲入，達到殺滅的濃度、劑量，也就能徹底將外、中、里層的全部細菌殺滅，達到徹底消毒的目的、效果。所以，消毒用酒精的最佳濃度應為65——75 ％。

綜合評價酒精的殺滅效果后，確定我們常用酒精的濃度應是65——75%。這樣，酒精的殺滅因子既可以滲入菌體內，也能深入菌群的深層內部，接觸到每一粒細菌，將它們盡數都殺滅，做到科學合理應用酒精消毒劑。

三、低濃度的酒精不能提供足夠數量的殺滅因子，也就不能殺滅細菌。

四、酒精極易揮發

消毒酒精配好后，應立即置于密封性能良好的瓶中密封保存、備用；使用后也應立即蓋好瓶蓋。以免因揮發而降低濃度，落入灰塵、雜菌被污染，影響殺菌效果。酒精的刺激性也較大，應忌用粘膜消毒。

五、酒精是中效消毒劑

酒精消毒劑是中效消毒劑，能殺滅結核桿菌；不能殺死如：細菌芽孢、部分種類的真菌、病毒等微生物。不能殺死的細菌，其菌體內的毒素，往往是蛋白質，就會隨著細菌的裂解而釋放，繼續對人體產生有害作用。大多數種類的、由空氣中落入酒精消毒劑中的細菌，在較長時間的酒精浸泡后，由于細菌的氧化酶失去活性，代謝被抑制細菌也會死亡。同時酒精也能篩選出耐受酒精殺滅的微生物，其中耐藥的致病性微生物就會對人體造成更大的傷害，而難以治愈。因此，落入灰塵被污染的酒精消毒液就應該被更換掉。現在，規定醫院三天更換一次。個人家庭視污染情況而定；不能用其消毒毛絨兒童玩具。