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熒光免疫技術

放大字體  縮小字體 發布日期:2006-06-28

原理

應用熒光素標記的抗體或抗原進行免疫沉淀反應,然后置于熒光顯微鏡下觀察。此法有利于微量可溶性抗原的檢查和鑒定。


材料與試劑配制

1.熒光素標記抗體(或抗原)

2.待測可溶性抗原(或抗體)

3.醋酸纖維膜(10cm×2.5cm)

4.0.05Mol/L pH8.2巴比妥緩沖液

5.洗滌液 pH10.0的巴比妥緩沖液。

6.液體石蠟


操作方法

1.取5μl待測抗原進行膜電泳(見醋酸纖維膜電泳一節)電壓6V/cm~10V/cm,電流0.4mA/cm,電泳2h。

2.取下膜放入濕盒內,沿抗體槽的位置放一條含標記抗體濾紙條(約10μl),在室溫中孵育過夜。

3.去掉抗體紙條,將膜浸在洗滌液中1h。

4.流水中沖洗10min,置室溫干燥。

5.干后浸入液體石蠟中使其透明10min。

6.用熒光顯微鏡觀察熒光弧。

 
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