1 .檢驗方法

依據(jù) GB 4789.2-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗 菌落總數(shù)測定》中要求以無菌操作取檢樣25g（mL）剪碎放于含有225mL滅菌生理鹽水或磷酸鹽緩沖液中，經(jīng)振搖或研磨做成1︰10的均勻稀釋樣液，按照標(biāo)準(zhǔn)要求制備10倍系列稀釋樣品勻液。根據(jù)污染情況的估計，選擇2～3個稀釋度，每個稀釋度作2個平皿，每個平皿注入培養(yǎng)基約15~20mL，并轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿使混合均勻，待瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平板，置36℃±1℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)48h±2h。計數(shù)后以同稀釋度的各平板平均菌落總數(shù)報告。

2. 數(shù)學(xué)模型

設(shè)菌落總數(shù)為A，檢測結(jié)果為X，則A=X CFU/g（mL）。

3 .計算不確定度
3.1 在微生物檢驗中，樣品中細(xì)菌分布的均勻性和重復(fù)測量帶來的不確定度是影響檢驗結(jié)果準(zhǔn)確度的主要原因，而B類不確定度分量對合成不確定度影響較少。按 GB 4789.2-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗 菌落總數(shù)測定》中方法，同一樣品每個稀釋度作兩個平衡樣，因此可以采用合并樣本標(biāo)準(zhǔn)差求檢測結(jié)果的不確定度 見表1。

3.2 從檢驗結(jié)果可知，如直接用貝塞爾公式計算合并樣本標(biāo)準(zhǔn)差，由于數(shù)據(jù)的散發(fā)性較大，計算出的合并樣本標(biāo)準(zhǔn)差很大，當(dāng)樣本均值較小時其不確定度則會過大，此時可以對上述數(shù)據(jù)取對數(shù)后，計算出樣本檢驗結(jié)果對數(shù)值的均值和殘差，將中間計算結(jié)果 見表2。根據(jù)貝賽爾公式，可計算出檢測結(jié)果對數(shù)值的合并樣本標(biāo)準(zhǔn)差：

取置信水平P＝95%，自由度ν＝19，查t分布表得：

分布于X±0.043之間。當(dāng)檢測結(jié)果以平衡樣結(jié)果平均值表示時，相對于對數(shù)值的取值再取反對數(shù)得其取值區(qū)間。這個取值區(qū)間適合于任何一次檢測。

3.3 例1、3#樣品，對數(shù)值的平均值為2.708，取值區(qū)間為2.665～2.751，取反對數(shù)得平衡樣平均值的取值區(qū)間為462～564 CFU/g（mL），菌落總數(shù)的取值區(qū)間為460～560CFU/g（mL）。

例2、12#樣品，對數(shù)值的平均值為3.203，取值區(qū)間為3.160～3.246，取反對數(shù)得平衡樣平均值的取值區(qū)間為1445～1762u/g（mL），菌落總數(shù)的取值區(qū)間為1400～1800CFU/g（mL）。

例3：18#樣品，對數(shù)值的平均值為4.0115，取值區(qū)間為3.9685～4.0545，取反對數(shù)得平衡樣平均值的取值區(qū)間為9300～11337 u/g（mL），菌落總數(shù)的取值區(qū)間為9300～11000CFU/g（mL）。

4 .小結(jié)
從以上計算結(jié)果可知，由于檢驗結(jié)果的散發(fā)性較大，如直接用貝賽爾公式計算合并樣本標(biāo)準(zhǔn)差所得到的不確定度不適合每一個樣本。當(dāng)檢驗結(jié)果取對數(shù)后，用合并樣本標(biāo)準(zhǔn)差求檢驗結(jié)果的不確定度則使用方便，并且適合于每一個樣本。隨著檢驗結(jié)果的不斷增加，可隨時加入到合并樣本中，重新計算合并樣本標(biāo)準(zhǔn)差，更新其不確定度的取值范圍。