91小视频在线观看-91小视频在线观看-91小视频-91小视频-欧美成人免费视频-欧美成人免费电影

VIP標識 上網做生意,首選VIP會員| 設為首頁| 加入桌面| | 手機版| RSS訂閱
食品伙伴網服務號
 

質粒DNA的大量制備

放大字體  縮小字體 發布日期:2006-07-02
    (1)將2ml含相應抗生素的LB液體培養基加入到通氣良好的15ml的試管中,接入一單菌落,于37℃劇烈振蕩培養過夜。
  (2)將1ml含菌液倒入含相應抗生素的Lb 100ml中,37℃振蕩培養至A590=1.0(5~6h)。
  (3)加氯霉素(170μg/ml)擴增,37℃溫箱中培養過夜。
  (4)收集菌液于離心管中,冰浴10min。3000rpm,離心10min,去上清。
  (5)加溶液Ⅰ5ml懸浮菌體,將懸液倒入高速離心管中,搖勻,冰浴5min。
  (6)加溶液Ⅱ10ml輕輕混勻,室溫下5min。
  (7)加溶液Ⅲ7.5ml輕輕混勻,冰浴30min。15000rpm,4℃離心20min。
  (8)取上清液于高速離心管中,加2倍體積的無水乙醇,混勻,入-20℃3~5h。
  (9)15000rpm 4℃ 離心20min。
  (10)棄上清,將離心管倒放入真空泵中抽干(10~15min)。
  (11)用5ml1×TE溶解,加入RNase A 15~20μl,42℃水浴4h于過夜。
  (12)加入5ml飽和酚,混勻,4000~5000rpm離心5min,取上清液入5ml離心管內。
  (13)分別加入2.5ml飽和酚,2.5ml氯仿,混勻后同樣離心收集上清。
  (14)加等體積氯仿/異戊醇(24:1)混勻,同樣離心收集上清。
  (15)加入1/10體積的3mol/l NaAc及2倍體積的無水乙醇于-20℃3~5h。
  (16)10000rpm 4℃離心20min。
  (17)棄上清,加入75%乙醇洗滌2次。
  (18)離心棄上清,真空抽干,加入適量1×TE溶解質粒DNA。
 
[ 網刊訂閱 ]  [ 食品專題搜索 ]  [ ]  [ 告訴好友 ]  [ 打印本文 ]  [ 關閉窗口 ] [ 返回頂部 ]

 

 
推薦圖文
推薦食品專題
點擊排行
 
 
Processed in 0.153 second(s), 19 queries, Memory 0.88 M
主站蜘蛛池模板: 国产真实灌醉美女疯狂弄 | 夜夜福利 | 国产午夜小视频 | 国模吧2021新入口 | free性欧美69高清 | 亚洲国产精品久久网午夜 | 你懂得国产| 亚洲国产激情在线一区 | 日本成人在线网址 | 欧美影院一区二区 | 999久久久免费精品国产牛牛 | 色综合天天综合给合国产 | 久青草国产在线视频_久青草免 | 日本在线不卡视频 | 人人插人人| 一级毛片aa | 色噜噜狠狠成人中文小说 | 亚洲综合精品一区二区三区中文 | 丁香色婷婷 | 91视频精品| 高h肉肉视频在线播放观看 高黄视频 | 亚洲人色大成年网站在线观看 | 午夜高清视频在线观看 | 天天黄色 | 视频在线观看高清免费大全 | 黄色片网站日本 | 五月天免费在线播放 | 久久精品乱子伦免费 | 男女刺激性视频大片 | 欧美日韩亚洲国产一区二区综合 | 国产美女视频黄a视频免费全过程 | 天堂中文在线观看 | 国产黄大片在线观看 | 女人18毛片水多 | 中国美女乱淫免费看视频 | 国产aaaaa一级毛片 | 精品特级毛片 | 日韩成人免费一级毛片 | 精品一级毛片 | 日本三级免费网站 | 动漫精品成人免费网站 |