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核酸分子雜交

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-06
核心提示:分子雜交(簡稱雜交,hybridization)是核酸研究中一項最基本的實驗技術。其基本原理就是應用核酸分子的變性和復性的性質,使來源不同的DNA(或RNA)片段,按堿基互補關系形成雜交雙鏈分子(heteroduplex)。雜交雙鏈可以在DNA與DNA鏈之間,也可在RNA與DNA鏈之間形成。雜交的局示

  分子雜交(簡稱雜交,hybridization)是核酸研究中一項最基本的實驗技術。其基本原理就是應用核酸分子的變性和復性的性質,使來源不同的DNA(或RNA)片段,按堿基互補關系形成雜交雙鏈分子(heteroduplex)。雜交雙鏈可以在DNA與DNA鏈之間,也可在RNA與DNA鏈之間形成。雜交的局示褪竊諞歡ㄌ跫?率夠ゲ購慫崍詞迪指蔥?加熱或堿處理)使雙螺旋解開成為單鏈,因此,變性技術也是核酸雜交的一個環(huán)節(jié)。255-1a.JPG (17962 bytes)

  若雜交的目的是識別靶DNA中的特異核苷酸序列,這需要牽涉到另一項核酸操作的基本技術─探針(probe)的制備。探針是指帶有某些標記物(如放射性同位素32P,熒光物質異硫氰酸熒光素等)的特異性核酸序列片段。若我們設法使一個核酸序列帶上32P,那么它與靶序列互補形成的雜交雙鏈,就會帶有放射性。以適當方法接受來自雜交鏈的放射信號,即可對靶序列DNA的存在及其分子大小加以鑒別。在現代分子生物學實驗中,探針的制備和使用是與分子雜交相輔相成的技術手段。核酸分子雜交作為一項基本技術,已應用于核酸結構與功能研究的各個方面。在醫(yī)學上,目前已用于多種遺傳性疾病的基因診斷(gene diagnosis),惡性腫瘤的基因分析,傳染病病原體的檢測等領域中,其成果大大促進了現代醫(yī)學的進步和發(fā)展

 
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