91小视频在线观看-91小视频在线观看-91小视频-91小视频-欧美成人免费视频-欧美成人免费电影

VIP標識 上網做生意,首選VIP會員| 設為首頁| 加入桌面| | 手機版| RSS訂閱
食品伙伴網服務號
 

白細胞DNA的制備

放大字體  縮小字體 發布日期:2006-07-05
    (1)采集外周靜脈血10ml,加1.7ml ACD(檸檬酸0.48g、檸檬酸鈉1.32g、葡萄糖1.47g、加水至100ml,0.6kg/cm2滅菌30min)抗凝。
  (2)將血液放入已滅菌的50ml塑料離心管內,加30mlSTMT[0.32mol/L蔗糖、10mmol/l Tris-HCl(pH7.5)、5mmol/L MgCl2、1%Triton –X 100],輕輕上下振蕩至透明,紅細胞完全溶解。
  (3)冰浴10min,離心,3000rpm,10min。棄上清,STMT重復處理1~3次。
  (4)棄上清,白色沉淀物加10ml STE[0.1mol/L NaCl、10mmol/l Tris-HCl(pH8.0)、1mmol/L EDTA(pH8.0)],先少量,充分混勻,然后加10mg/ml蛋白酶K100μl,20%SDS30μl,搖勻,置37℃水浴15~20h。
  (5)用等體積飽和酚抽提,3000rpm離心5min。
  (6)用大口鈍緣吸管小心吸取上層水相,加飽和酚和氯仿-異戊醇(24:1)抽提,3000rpm離心5min 。
  (7)小心吸取上層水相,用等體積氯仿-異戊醇(24:1),抽提,3000rpm離心5min。
  (8)小心吸取上層水相,加入1/10體積3mol/l NaAc,2.5體積預冷無水乙醇混勻,-20℃過夜。
  (9)將白色絮狀沉淀物用玻璃棒挑出,放入Eppendorf管內,加1ml 75%乙醇4℃靜置1h,離心,10000rpm 10min。
  (10)棄上清,用蠟膜將管口封好,針刺數個小孔,真空抽提(10~15min)。
  (11)加200μl 1×TE溶解,置4℃保存。
  (12)對所提DNA用紫外分光光度計進行定量和純度檢測。
  (13)取2~4μl DNA樣品,經瓊脂糖凝膠(Agarose)電泳,檢查所提DNA的質量及降解情況。
 
[ 網刊訂閱 ]  [ 食品專題搜索 ]  [ ]  [ 告訴好友 ]  [ 打印本文 ]  [ 關閉窗口 ] [ 返回頂部 ]

 

 
推薦圖文
推薦食品專題
點擊排行
 
 
Processed in 0.015 second(s), 17 queries, Memory 0.88 M
主站蜘蛛池模板: 国产精品夜夜春夜夜爽 | 亚洲伊人久久网 | 五月天色婷婷丁香 | 欧美成人精品欧美一级乱黄 | 亚洲成人高清在线观看 | 好爽好大www视频在线播放 | 欧美日韩免费大片 | 欧美性猛交xxxx乱大交 | 黄色国产在线视频 | 免费日本视频 | 在线播放91灌醉迷j高跟美女 | 色噜噜亚洲 | 色佬网 | 欧美黄业| 好黄好猛好爽好痛的视频 | 亚洲精品久久久久久婷婷 | 欧美日韩精品一区二区另类 | xxxx性欧美高清 | 五月激情久久 | aaa网站| 免费伦费一区二区三区四区 | 天天摸天天做天天爽水多 | 特级黄aaaaaaaaa毛片 | 色www永久免费视频 色y情视频免费看 | 干成人网 | 九九精品久久久久久噜噜 | 91啪在线视频 | 午夜性a一级毛片 | 一级特黄特黄的大片免费 | 女人69xxx| 1024免费永久福利视频 | 国产亚洲精品激情都市 | 欧美日韩色图 | 午夜在线播放视频在线观看视频 | 日本三级日本三级人妇三级四 | 日本高清免费aaaaa大片视频 | 麦克斯奥特曼在线观看 | 欧美一区二区三区综合色视频 | 华人永久免费视频 | 国产日韩三级 | 久久久久久久久久免观看 |