單拷貝克隆產量低，高拷貝克隆穩定性差，一直讓研究者在克隆表達時難以選擇。蛋白的表達就有誘導表達系統，可以實現人為地控制蛋白的表達時間和表達量——現在連質粒的拷貝數可以借助誘導的方法來人為控制了！Epicentre的專利技術——CopyControl克隆系統能夠讓您共享單拷貝和高拷貝的優點。CopyControl克隆首先以單拷貝形式生長——單拷貝可以確保插入穩定及成功克隆編碼毒性基因序列——在需要的時候，再誘導成高拷貝克隆，以便下游應用所需。這一系統可以用來構建PCR克隆，對于BAC，fosmid文庫等大型質粒格外有用。

CopyControl克隆系統有兩個重要的成分：
1．CopyControl pCC1 Vector.
這個載體含有兩個復制起始位點：單拷貝的大腸桿菌F-因子復制子，和誘導型的高拷貝oriV。 OriV的啟動，需要trfA基因產物，trfA基因既不在pCC1 Vector上，也不在其他常規用來克隆的大腸桿菌菌株中，這個基因由CopyControl 的第二個重要元件—— TransforMax EPI300 E.coli菌株提供。

2．TransforMax EPI300 E.coli.
這是一個工程菌株，含有受誘導啟動子嚴謹控制的trf A基因，在誘導表達的條件下可以提供啟動oriV所需要的trf A基因產物。另外phage T1-resistant TransforMax EPI300-T1R E.Coli也可提供這個基因的產物。

CopyControl克隆和克隆誘導步驟：

1、將目標DNA片斷連接到已經線性化、去磷酸化的CopyControl pCC1 Vector上。

2、轉化感受態細胞（TransforMax EPI300 E.coli），涂皿，在氯霉素LB培養基上篩選。在這種條件下，trfA基因的表達被抑制，克隆以單拷貝數量生長。

3、挑選克隆，單個培養。

4、加CopyControl誘導溶液到管中。誘導溶液誘導TransforMax EPI300 宿主細胞內trfA基因的表達，從而啟動oriV，克隆由單拷貝轉化為高拷貝。

5、用常規方法從誘導細胞內分離DNA。

這個系統用于常規PCR克隆或者文庫構建時，經過誘導，每個細胞中的質粒拷貝數可以從1個提高到200個，非常厲害，對于下游的表達或者核酸純化、測序等都很有幫助。而對于BAC和Fosmid等低拷貝的大型質粒來說，單拷貝的克隆的穩定性是非常重要的考慮因素，經過誘導后每個細胞中質粒的拷貝數可以達到10—50個，對于后繼的實驗更有重要的意義。