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mRNA-PCR定量

放大字體  縮小字體 發布日期:2006-07-01
由于MRNA-PCR定量需經兩個酶(RT和Taq)催化,因而影響因素較多。1989年Wang等報道了低豐度mRNA絕對定量方法。利用濃度已知且與待測靶mR-NA序列相同的內對照mRNA(其片段長短不同,便于PCR擴增后產物的分離),在同一體系中,用相同的由32P標記的引物與待測mRNA一同進行逆轉錄和PCR擴增,擴增產物電泳后,分別測定二者產物放射性強度,由預先制備的標準曲線推算出每個樣本特異mRNA的量。Gilliland等的結果表明,在1ng總RNA中可以對小于1pg的特異mRNA進行定量。這一定量方法在腫瘤、代謝失調、基因表達調控等研究中均有重要意義。
 
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鏇村

 

 
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